Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manuale (Pagina 5)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Istruzioni per l'uso TA9217 IT-CE-Rev_D 08/04/2013
Principio di procedura
Il Leica HER2 FISH System - 30 Test contiene i componenti necessari per completare una
procedura di colorazione mediante ibridazione fluorescente in situ per tessuti fissati in formalina
e conservati in paraffina. In seguito ad un adeguato pretrattamento, un'incubazione con
LSI HER2/CEP17 Dual Probe pronta all'uso e un lavaggio di stringenza, le sezioni tissutali
vengono disidratate e montate con DAPI. I risultati vengono interpretati mediante microscopio a
fluorescenza usando i filtri raccomandati a lunghezze d'onda adeguate.
Il Leica HER2 FISH System - 30 Test è da utilizzare solo sul Leica BOND-MAX and BOND-III
System.
Componenti forniti
I materiali sotto elencati (Tabella 1) sono sufficienti per colorare 30 test (30 vetrini colorati con
LSI HER2/CEP17 Dual Probe).
LSI HER2/CEP17 Probe
6,6 ml
Contiene LSI HER2/CEP17 Dual Probe pronta all'uso.
Contiene <60% (v/v) formammide.
Post Hybridization Wash 2
9 ml Contiene soluzione di lavaggio post-ibridazione pronta all'uso.
Contiene <50% (v/v) formammide.
Leica BOND Enzyme
Concentrate 2
1 ml
Contiene soluzione Proteinase K a 1,7 mg/mL.
Leica BOND Enzyme Diluent
65 ml
Contiene diluente per enzima.
Leica BOND Open Container
3 x 7 ml BOND Open Container utilizzato per Enzyme 5.
Tabella 1: Componenti Leica HER2 FISH System - 30 Test
Fare riferimento alla singola MSDS per ulteriori informazioni sulla sicurezza del prodotto,
disponibili sul sito www.LeicaBiosystems.com/TA9217 - IFU
Indicazioni sull'utilizzo
Tutti i reagenti forniti sono formulati per essere usati nello specifico con questa analisi e i numeri
di lotto sono specifici per ciascun Leica HER2 FISH System - 30 Test. Per garantire la validità di
questa analisi, non deve essere eseguita alcuna sostituzione.
Conservazione e stabilità
Conservare a temperature tra 2 e 8 °C. Non congelare. Riportare a 2–8 °C subito dopo l'uso.
Qualsiasi discostamento da queste condizioni invaliderà l'analisi. Accertarsi che il Leica HER2 FISH
System - 30 Test utilizzato non sia già scaduto. I segnali indicanti contaminazione e/o instabilità
del Leica HER2 FISH System - 30 Test sono torbidità delle soluzioni (tranne che per la soluzione
della sonda) e sviluppo di odori. Le condizioni di conservazione diverse da quelle specificate devono
essere verificate dall'utilizzatore.
Preparazione dei campioni
I metodi standard per l'elaborazione dei tessuti devono essere applicati a tutti i campioni (19).
Si raccomanda di preparare i tessuti in fissativi a base di formalina, di trattarli normalmente e
includerli in paraffina. Ad esempio, i campioni dovrebbero essere raccolti ad uno spessore di
3–4 mm e fissati per 18–24 ore in formalina tamponata neutra al 10%. I tessuti devono quindi
essere disidratati in una serie di alcoli e puliti mediante xilene, seguito da impregnazione con cera
paraffinica fusa, conservata a non più di 60 °C. I campioni di tessuto vanno sezionati tra 4–6 µm.
Le sezioni tissutali montate sui vetrini (Leica BOND Plus Slides S21.2113) possono essere
conservate per 12 mesi a 2–8 °C prima della colorazione. In seguito al sezionamento, si