Hoefer SE640 - Manuale (Pagina 43)

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Per gel sfumatura lineare, utilizzare volumi uguali
di% basso e soluzioni ad elevata% di acrilam-
mide nei 2 rami del produttore di gradiente.
Meno APS viene aggiunto per estendere il tempo
di polimerizzazione, e ancor meno viene aggi-
unto alla soluzione% superiore T per permettere
polimerizzazione avvenga dall’alto verso il basso.
Nella nostra esperienza con le concentrazioni
nell’esempio gradiente 10-20% di seguito, gel può
essere versata ad una portata di 5-10 ml/min.
Gradiente lineare gel
(per 100 ml di soluzione)
10% T 20% T
Acrylamide stock (Soluzione #1) 33,30 ml 66,70 ml
Saccharose — 15,00 g
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Soln, #2) 25,00 ml 25,00 ml
10% SDS (Soluzione #4) 1,00 ml 1,00 ml
H
2
O deionizzata a 100,00 ml a 100,00 ml
10% APS (Soluzione #5) 0,300 ml 0,060 ml
TEMED 0,036 ml 0,036 ml