Hoefer SE640 - Manuale (Pagina 42)

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Gel ricette
Le ricette sono gel di Laemmli per 30 ml di una
soluzione singola concentrazione (abbastanza per
due 1,5 millimetri, 18 × 8 cm gel). Tabellare sono
gli ingredienti e volumi per i gel pori relativa-
mente grandi (7,5-10% gamma T), così come pic-
coli pori gel (12,5-15% gamma T). Un gel al 4%
accatastamento è comune. La ricetta gradiente
lineare è di 100 ml di soluzione. Il volume totale
necessaria dipende dal numero di fusione gel e lo
spessore gel; regolare come necessario. Tutti i gel
sono reticolati con il 2,6% C.
Laemmli gel
(per 30 ml di soluzione gel risolutivo, 5 ml di soluzione di gel di impilamento)
Gel separatore Stacking gel
7,5% 10% 12,5% 15% 4%
Acrilamide stock (Solution #1) 7,5 ml 10,0 ml 12,5 ml 15,0 ml 0,67 ml
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Soln, #2) 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml —
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Soln, #3) — — — — 1,25 ml
10% SDS (Solution #4) 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,05 ml
H
2
O deionizzata 14,6 ml 12,1 ml 9,6 ml 7,1 ml 3,00 ml
10% APS (Solution #5) 150 µl 150 µl 150 µl 150 µl 25 µl
TEMED 10 µl 10 µl 10 µl 10 µl 2,5 µl
Volume finale 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 5,0 ml