Luminex xPONENT 4.01 SP1 - Manuale (Pagina 156)

Luminex xPONENT 4.0 Manuale del software
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3. Modificare le informazioni come desiderato nelle schede Protocol, Std & Ctrls e Plate
Layout (Layout piastra).
4. Fare clic su Save (Salva) nella scheda Plate Layout (Layout piastra).
Vedere “Scheda Settings (Impostazioni)” a pagina 28 per ulteriori informazioni sulle
impostazioni del batch.
Run Batch (Esegui batch)
Aprire la pagina Batches (Batch). Selezionare il batch in sospeso che si desidera
eseguire quindi fare clic su Run.
NOTA: se il batch comprende più di una piastra, il vassoio viene
espulso automaticamente quando tutti i pozzetti definiti sono
stati acquisiti. Una finestra di dialogo richiede l’inserimento
delle piastra successiva.
Esecuzione analisi
Se si sta utilizzando un software di terza parte per eseguire l’analisi, consultare il relativo
manuale.
A prescindere dal tipo di batch, è possibile indicare al sistema di acquisire repliche di
campioni. Nel caso di batch qualitativi, si opera una media dei risultati qualitativi dei
replicati e l’interpretazione del rapporto viene determinata partendo da tale media.
Le repliche dei batch quantitativi si basano su una curva standard generata tramite “Fit of
All Standards” (Adattamento di tutti gli standard) o mediante “Mean of Replicates” (Media
delle repliche). L’impostazione predefinita è “Fit of All Standards” (Adattamento di tutti gli
standard). I campioni sconosciuti vengono calcolati partendo dalla curva standard. Viene
calcolata una media dei risultati dei test per le repliche dei campioni per determinare il
risultato quantitativo riportato come “AVG”.
Un batch acquisito può essere analizzato utilizzando le funzioni degli algoritmi Qualitative
(Qualitativa), Quantitative (Quantitativa), e Allele Call (Attribuzione allele).
Analisi qualitativa. Determina i risultati come positivo o negativo, reattivo o non reattivo e
così via. Il sistema è flessibile per quanto riguarda la definizione degli intervalli dei risultati
personalizzati, ad esempio negativo, leggermente positivo, molto positivo.
Analisi quantitativa. Determina le concentrazioni di campioni delle curve standard,
utilizzando metodi di regressione, come ad esempio l’adattamento logistico curva a 4P
o 5P.
Esistono due tipi di analisi principali: non competitivo e competitivo. In un’analisi non
competitiva, la pendenza della curva standard di una concentrazione rispetto alla MFI
(Median Fluorescent Intensity, intensità di fluorescenza mediana) è rappresentata da un
numero positivo. In altre parole, le basse concentrazioni implicano bassi valori MFI,
mentre le concentrazioni elevate producono valori MFI elevati. Al contrario, le analisi
competitive generano una curva standard con una pendenza negativa, i cui punti finali
sono un elevato valore MFI/bassa concentrazione a sinistra e basso valore MFI/elevate
concentrazioni a destra.