Hoefer HE33 - Manuale (Pagina 21)

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1. 10X Tris-borato-EDTA (TBE) della scorta †
(0,89 M Tris, 0,89 M acido borico, 20 mM EDTA,
pH ~8,2, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1) 0,89 M 108,0 g
Acido borico (FW 61,8) 0,89 M 55,0 g
EDTA soluzione
(0,5 M, pH 8,0, soluzione 3) 0,02 M
40,0 ml
H
2
O deionizzata a 1000,0 ml
Mescolare. Non regolare il pH. Prima dell’uso diluire
sia a: 0,5X, per ottenere 45 mM Tris base 45 mM
acido borico, e 1 mM EDTA. Questa diluizione viene
spesso usato perché la corrente rimane bassa, con
conseguente meno calore.
-O-
1X, per dare 89 mM Tris base 89 mM di acido borico,
e 2 mM EDTA.
2. 10X Tris-acetato-EDTA (TAE) della scorta †
(0,4 M Tris, 0,2 M acido acetico, 10 mM EDTA,
pH ~8,4, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1) 0,40 M 48,4 g
Acido acetico (99,5%) 0,20 M 11,4 ml
EDTA soluzione
(0,5 M, pH 8,0, soluzione 3)
0,01 M 20,0 ml
H
2
O deionizzata a 1000,0 ml
Mescolare. Non regolare il pH. Diluire a 1X prima
dell’uso per dare 40 mM Tris base 20 mM di acido
acetico, e 1 mM EDTA.
3. Soluzione di EDTA
(acido etilendiamminotetraacetico)
†
(0,5 M, pH 8,0, 100 ml)
Na
2
EDTA·2H
2
O, (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g
H
2
O deionizzata a 70,0 ml
NaOH (10 M) a pH 8,0 ~5,0 ml
H
2
O deionizzata a 100,0 ml
† Modificato da Sambrook, J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual,
p. B.23 (1989). Vedi anche Current Protocols in Molecular Biology,
p. A.2.1 (1993).