Hoefer HE33 - Manuale (Pagina 18)

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Risoluzione dei problemi
problema soluzione
Campione Deformed bene Lasciare che il gel da impostare per un minimo di 30 minuti
e assicurarsi che sia a temperatura ambiente prima di rimuo-
vere il pettine.
Quando si rimuove il pettine, tenerla leggermente inclinata e
sollevare molto lentamente per evitare che il gel di rottura.
Fare attenzione a non danneggiare il bene con la pipetta
durante il caricamento del campione, obiettivo per il centro del
pozzo e non bucherellare il fondo con la punta della pipetta.
I campioni non corre lungo un Se un vassoio pettine o in esecuzione è deformato, sostituirlo.
percorso rettilineo
Ridurre la tensione.
Scegli un buffer con la forza appropriata ionica e la capaci-
tà di buffering. (La capacità tampone TBE, per esempio, è
superiore a quella di TAE.) Se il buffer è esaurito, fermare la
corsa, rimuovere il coperchio, e pipettare il buffer di ciascuna
camera nella camera opposta per riempire il buffer.
Se il gel è irregolare, il vassoio livello colata prima di versare
il gel.
Double-banded modello Il pettine deve essere verticale per evitare distorsioni e forma.
Diminuire il livello del buffer di 1 mm sopra la superficie del
gel, per ridurre il gradiente verticale di temperatura.
Fascia bassa risoluzione Aggiungere Ficoll ™ , glicerolo, saccarosio o di tampone di cari-
camento campione per assicurarsi che il campione si deposita
sul fondo del pozzo. (Ficoll è preferito.)
Assicurarsi che il campione è completamente sciolto.
Ridurre la tensione.
Ridurre la concentrazione del campione.
Ridurre il volume del campione.
Almeno 1 mm di gel sotto il fondo del pettine è necessaria
per evitare campioni di fuoriuscire dal fondo del pozzetto.
Ridurre la concentrazione di sale del campione.
Controllare l’attività enzimatica, il campione può richiedere
più la digestione o di un buffer di restrizione diverso.
Preparare il campione fresco se si sospetta la contaminazione
nucleasi.
Scegli agarosio con un valore endosmosi basso.
Cuscinetti di gommapiuma si staccano Installare il vassoio in esecuzione come come descritto a
pagina 5, non si preme verso il basso in posizione.