Luminex FLEXMAP 3D Hardware User Manual - Manuale (Pagina 23)

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CAPITOLO 2
Panoramica tecnica
Questo capitolo tratta gli aspetti tecnici del sistema FLEXMAP 3D di Luminex:
funzionamento, componenti del sistema, dispositivi supplementari consigliati e specifiche.
Come funziona il sistema FLEXMAP 3D
Il sistema FLEXMAP 3D, in combinazione con la tecnologia xMAP® (Multi-Analyte
Profiling, ovvero caratterizzazione multi-analita), misura contemporaneamente fino a
500 analiti da un unico campione. La tecnologia xMAP include microsfere, processi di
colorazione proprietari, fluidici basati sulla citometria a flusso, laser, i più innovativi
algoritmi per segnali digitali ad alta velocità e algoritmi informatici avanzati, attuando un
sistema di rilevamento di molteplici analiti che presenta sensibilità e specificità eccellenti.
Un affermato processo proprietario creato da Luminex per tingere internamente
microsfere di polistirolo delle stesse dimensioni con molteplici fluorofori facilita la
creazione di 500 microsfere distinguibili quando questi fluorofori vengono combinati in
diverse concentrazioni. Le microsfere, distinte per colore, vengono eccitate da due laser
nello strumento FlexMAP 3D. L'emissione che ne risulta viene rilevata da fotodiodi a
cascata (APD) in tre canali di classificazione (CL1, CL2 e CL3) e viene poi ulteriormente
analizzata usando un diverso APD in un canale di discriminazione dei doppioni (DD), che
misura la dimensione dei granuli per mezzo della diffusione laterale.
Gli analiti vengono legati alle microsfere di xMAP utilizzando la stessa chimica di
superficie usata con i precedenti strumenti Luminex (LX100/200). I reporter,
contrassegnati con etichette fluorescenti eccitati a una lunghezza d'onda diversa da
quella dei coloranti interni, si legano all'analita relativo e vengono rilevati da un tubo
fotomoltiplicatore (PMT) in un canale reporter (RP1), consentendo di eseguire un'analisi
quantitativa. Non appena le microsfere scorrono rapidamente attraverso i raggi del laser,
algoritmi del segnale digitale ad alta velocità e informatici distinguono quale analita viene
trasportato in ogni microsfera e quantificano la reazione in base al segnale del reporter
fluorescente. I risultati vengono analizzati dal software del sistema e presentati in forma
leggibile per l'analisi.