Hoefer HE-PLUS System - Manuale (Pagina 16)

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C. Rimozione del pettine
1
Quando il gel è solidificato e completamente opaco,
rimuovere con attenzione il pettine con un delicato
wiggling, movimento verso l’alto. Se il pettine è
difficile da rimuovere o se una bassa percentuale
gel viene utilizzato, sovrapporre l’area pettine con
un piccolo volume di 1X tampone di elettroforesi per
preservare l’integrità dei pozzetti. Controllare i pozzi
per assicurare le loro basi sono intatti.
D. Caricamento dei campioni sul gel
1
Rimuovere il vassoio di fusione contenente il
gel di agarosio indurito dal dispositivo di colata
sollevando le estremità. Posizionare il vassoio e gel
in l’assemblaggio del gruppo principale in modo che
i pozzetti dei campioni sono la stessa fine come il
negativo (nero) elettrodo.
2
Il riempimento completo con il tampone di
elettroforesi restante 1X contenente bromuro di etidio
in precedenza, che copre il gel ad una profondità di
1-5 mm. Circa 350 ml di tampone sarà richiesto.
3
Caricare i campioni nei pozzetti con una micropipetta
o un dispositivo simile facendo attenzione a non forare
il fondo dei pozzetti o caricare il campione attraverso
la superficie del gel.
Nota: L’uso di uno stesso lotto
di tampone di elettroforesi sia
per il gel e il tampone di corsa
è molto importante. Piccole
variazioni di composizione del
tampone tra il gel e il tampone
di corsa può provocare gradienti
ionici o pH che possono
influenzare notevolmente la
mobilità dei campioni.