Hoefer HE-PLUS System - Manuale (Pagina 11)

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Istruzioni per l’uso
A. Indicazioni per la scelta Tamponi gel
elettroforesi e le concentrazioni
I due tamponi più comunemente utilizzati per
elettroforesi orizzontale di DNA a doppio
filamento in gel di agarosio sono Tris-acetato-
EDTA (TAE) e Tris-borato-EDTA (TBE). Mentre
i poteri di risolvere questi buffer sono molto
simili, le capacità dei buffer relativi sono molto
diversi, conferendo attributi eseguire diversi che
vengono riassunte di seguito:
TAE
Tris-acetato è stata tradizionalmente il tampone più
comunemente usato. Tuttavia, la sua capacità tampone
relativamente bassa sarà esaurito durante l’elettroforesi
prolungata, rendendo il ricircolo del buffer necessaria
per piste superiori a 140 mA ore. I potenziali vantaggi
di utilizzare tampone TAE sopra tampone TBE
includono risoluzione superiore di DNA superavvolto
migrazione e circa il 10% più velocemente del doppio
filamento frammenti di DNA lineare.
TBE
Tris-borato è significativamente maggiore capacità di
tamponamento e la sua estrazione relativamente bassa
corrente elimina la necessità di ricircolo, ma in tutti i
percorsi più estesi (> 300 mA ore). Sistemi tampone
TBE sono sconsigliati quando frammenti devono
essere recuperati dal gel dopo l’elettroforesi.