Hoefer SE300 miniVE - Manuale (Pagina 27)

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Preparazione
Optional: raffreddamento passivo
Raffreddare circa 2 litri di acqua deionizzata
a 4 °C. (Riempimento del serbatoio con acqua
refrigerata funge da dissipatore durante electro-
transfer.)
Preparare buffer di trasferimento
Stack assemblaggio richiede circa 250 ml
tampone di trasferimento e un ulteriore
300-350 ml di tampone è necessaria per riempire
ciascun modulo. La ricetta per buffer Towbin è
elencato di seguito. La Bibliografia a pagina 26
elenca le fonti di altri buffer.
Towbin tampone
(25 mM Tris, 192 mM glicina, 0–20% (v/v) metanolo,
pH 8.3, 1 liter)
Tris (FW 121.1) 25 mM 3.0 g
Glicina (FW 75.07) 192 mM 14.4 g
SDS* (FW 288.4) fino 0.1% (3.5 mM) 1.0 g
* Optional: Aggiunta di SDS può migliorare l’efficienza di
trasferimento.

Sciogliere in 750 ml di acqua distillata.

Aggiungere metanolo come richiesto.
A seconda del tipo di membrana selezionato,
l’aggiunta di metanolo può migliorare i risultati di
trasferimento. Perché tamponi contenenti metanolo
può deteriorarsi se conservata per lunghi periodi,
aggiungere metanolo solo prima del trasferimento.

Portare a 1 litro con acqua distillata. Non regolare il
pH, che deve essere compresa tra 8,2 e 8,4.
Optional: Chill prima dell’uso.