Hoefer IEF100 - Manuale (Pagina 60)

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IPG Strip soluzione di reidratazione
2A. Urea reidratazione soluzione stock
Prepara 50 ml
8 M urea, 2% CHAPS, 0.002% blu di bromofenolo
Concentrazione finale Quantità
Urea (FW 60,06) 8 M 24 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Blu di bromofenolo 0,002% 1 mg
Acqua deionizzata a 50 ml
Conservare in 3 ml aliquote a -20 °C o inferiore. 3 ml è sufficiente per
reidratare sei IPG strisce di 24 cm.
Poco prima da utilizzare per la reidratazione IPG strip:
• Aggiungere 0,5–2,0% (v/v) anfoliti portanti (SERVALYTS).
• Aggiungere 9 mg per 3 DTT aliquota ml di soluzione di reidratazione
magazzino DTT 20 mM.
• Proteine campione può anche essere aggiunto al 3 ml di soluzione di
reidratazione.
2B. Thiourea reidratazione soluzione stock
Prepara 50 ml
7 M urea, 2 M tiourea, 2% CHAPS, 0.002% blu di bromofenolo
Concentrazione finale Quantità
Urea (FW 60,06) 7 M 21 g
Thiourea (FW 76,12) 2 M 7,6 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Blu di bromofenolo 0,002% 1 mg
Acqua deionizzata a 50 ml
Conservare in 3 ml aliquote a -20 °C o inferiore. 3 ml è sufficiente per
reidratare sei IPG strisce di 24 cm.
Poco prima da utilizzare per la reidratazione IPG strip:
• Aggiungere 0,5–2,0% (v/v) anfoliti portanti (SERVALYTS).
• Aggiungere 9 mg per 3 DTT aliquota ml di soluzione di reidratazione
magazzino DTT 20 mM.
• Proteine campione può anche essere aggiunto al 3 ml di soluzione di
reidratazione.