Hoefer HE99X - Manuale (Pagina 19)

2. 10X Tris-fosfato-EDTA (TPE) magazzino buffera a
(0,89 M Tris, 0,89 M di acido fosforico,
20 mM EDTA, pH ~8,1, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,89 M 108,0 g
Acido fosforico (85%) 0,23 M 15,5 ml
EDTA soluzione 0,02 M 40,0 ml
(0,5 M, pH 8,0, sol. 4)
H
2
O deionizzata a 1000,0 ml
Mescolare. Non regolare il pH. Diluire a 1X, per
produrre 89 mM Tris base, 23 mM acido fosforico,
e 2 mM EDTA.
3. 10X Tris-acetato-EDTA (TAE) della scorta a
(0,4 M Tris, 0,2 M acido acetico, 10 mM EDTA,
pH ~8,4, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,40 M 48,4 g
Acido acetico (99,5%) 0,20 M 11,4 ml
EDTA soluzione
(0,5 M, pH 8,0, sol. 4)
0,01 M 20,0 ml
H
2
O deionizzata a 1000,0 ml
Mescolare. Non regolare il pH. Diluire a 1X prima
dell’uso per dare 40 mM Tris base 20 mM di acido
acetico, e 1 mM EDTA.
4. Soluzione di EDTA
(acido etilendiamminotetraacetico)
b
(0,5 M, pH 8,0, 100 ml)
Na
2
EDTA·2H
2
O, (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g
H
2
O deionizzata a 70,0 ml
NaOH (10 M) a pH 8,0 ~5,0 ml
H
2
O deionizzata a 100,0 ml
a Sambrook J. and Russell, D.W., (2001) Molecular Cloning: A Labora-
tory Manual, A1.17
b Current Protocols in Molecular Biology (1993) A.2.1
•
p11