Hoefer SE615 - Manuale (Pagina 18)

Versare il gel di impilamento
È possibile aggiungere stacking gel per l’intero
set di gel polimerizzato (omogenea o gradiente),
mentre i panini sono ancora nella scatola cast-
ing, oppure si può aggiungere stacking gel a gel
singoli immediatamente prima dell’uso.
Per una risoluzione ottimale, aggiungere il gel
di impilamento all’ultimo minuto per evitare la
diffusione di buffer tra i due strati di gel.
1
Se si stanno riversando gel accatastamento in seguito,
passare al punto 1 in “Rimozione gel polimerizzate” a
pagina 16.
Se si sta versando gel di impilamento ora, calcolare il
volume di soluzione di gel di impilamento monomero
necessario facendo riferimento alla seguente formula:
Dove:
• Altezza è la distanza tra il gel di separazione e la
parte superiore delle piastre.
• Larghezza è la distanza tra i distanziatori.
2
Risciacquare in acqua satura di n-butanolo overlay
con acqua distillata o tampone Tris e invertire la
caster di scolarla. Ripetere questa 2-3 volte.
3
Degas la soluzione di gel di impilamento monomero e
aggiungere catalizzatore e iniziatore.
•
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Monomer vol. = altezza × larghezza × spessore × num. totale di × 1,1
(ml)
(cm) (cm) (cm) gel sandwiches