Hoefer TE42 - Manuale (Pagina 17)

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cassetta, allora questo lato si affaccia l’anodo
(+). La maggior parte delle proteine migrare
verso l’anodo nella Tris/glicina sistema tampone
Towbin/metanolo (indipendente dalla presenza
di SDS), e nella maggior parte delle condizioni
di acidi nucleici sono caricate negativamente e
anche migrare verso l’anodo.
Il raffreddamento è fortemente raccomandato.
Qualsiasi impostazione che si traduce in supe-
riori a 5 W di potenza genera calore sufficiente a
richiedere il controllo attivo di calore. Un bagno
circolatore refrigerato deve essere impostato
raffreddare fino a circa 10 °C. (Se si utilizza
50/50 etilene glicole/acqua, la temperatura può
essere inferiore.) Tampone gelido prima dell’uso,
se possibile.
Impostazioni di potenza consigliate. La maggior
parte dei trasferimenti sono state completate nel
giro di un’ora, ma molecole più grandi o più
spessi gel possono richiedere i tempi di trasfe-
rimento più lunghi, il tempo di trasferimento
ottimale per ogni sistema deve essere determinato
empiricamente. Trasferimenti lasciato correre
durante la notte dovrebbe essere impostata su un
valore di corrente costante non superiore a 0,1 A.
Importante! Non permettere
mai che la temperatura del
tampone superare i 45 °C. Il
calore eccessivo provoca l’unità a
deformarsi.
Parametri di trasferimento tipici
Parametri per il vostro campione e sistema tampone
deve essere determinato empiricamente.
proteina acidi nucleici
Buffer Towbin 1X TBE o TAE 1X
Corrente (A) 0,8-1,0 0,9-1,0
Tensione (V) 70-80 50
Tempo di trasferimento ~1 ora ~1 ora
Temperatura liquido 10 °C 10 °C o meno
di raffreddamento