Hoefer TE70X - Manuale (Pagina 24)

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problema soluzione
Binding inefficiente alla membrana
Parametri chimico
Preparare buffer di trasferimento senza SDS. (SDS
può migliorare l’efficienza di trasferimento, ma
possono interferire con la proteina di legame ad una
membrana di PVDF.)
Aggiungere 10-20% metanolo al buffer di trasferi-
mento per migliorare legame di nitrocellulosa o PVDF.
Membrana parametri Utilizzare una membrana con dimensione dei pori più
piccola (0,20 µm) se le proteine passano attraverso la
membrana.
Inserire una membrana sia sopra che sotto il gel
per acquisire eventuali proteine migrano nella dire-
zione opposta.
Verificare campione troppo è disponibile per la super-
ficie legame inserendo due membrane invece di uno.
Se “soffiare” si verifica, ridurre il carico campione.
Indossare i guanti quando si maneggiano le membrane.
Membrane Conservare a temperatura ambiente e
lontano dalla luce diretta.
Controllare durata di conservazione di membrana di
nitrocellulosa, sostituire se necessario.
TE70XP, TE77XP
Lettura corrente inferiore
Tensione massima (30 V) è stato raggiunto.
rispetto a quella del Buffer possono essere scariche.
Nessuna uscita di corrente Stack di trasferimento non è in contatto con l’elet-
trodo superiore. Aggiungi tamponare carte macchia
ammollati.
Messaggio di errore “dry” Strumento ha rilevato grandi variazioni nella resi-
stenza trasferimento pila.
Aggiungi altri articoli blot intrisi di buffer nei trasferi-
menti futuri.
Nessuna uscita di tensione Stack di trasferimento viene in corto circuito.
Nota: per idee più risoluzione dei problemi, fare riferimento a Bjerrum, O.J. et al. (1988).