Hoefer SE215 - Manuale (Pagina 12)

gel richiesto vol. gradiente macchina
caster gamma (ml) dimensione*
SE215 55–100 SG100
SE235 32–56 SG50 o SG100
SE275 22–40 SG30 o SG50
*La dimensione effettiva dipende dal volume calcolato.
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Preparare le soluzioni
Plug soluzione
Preparare la soluzione abbastanza attacco (50% di
saccarosio o glicerolo 75% in 1X tampone di gel
di separazione) per riempire lo spazio sottostante
i panini. Il SE215 richiede circa 30 ml e l’SE235
e SE275 richiede circa 15 ml. La soluzione viene
pompata nella spina dopo il gradiente di spostare
tutta la soluzione di monomero nello stack sandwich.
Opzionale: Aggiungere blu di bromofenolo per tenere
traccia la spina come è pompato nel gel caster
multipla.
Monomer soluzione
Seguire le istruzioni a pagina 6, punto 1 per il calcolo
del volume totale di soluzione di monomero necessari.
Dividere il volume totale a metà e preparare questo
volume di ciascuna delle soluzioni sulla superiori e
inferiori di acrilammide.
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Versare la soluzione “pesante” nella camera di
serbatoio (la camera più lontano dalla presa). Aprire
il rubinetto tempo sufficiente a spostare l’aria nel
collegamento tra le camere e poi stretti. Riempire
la soluzione di luce nella camera di miscelazione e
inserire una barra di agitazione in questa camera.
Porre a gradiente su un agitatore magnetico e iniziare
agitazione ad una velocità che non introduce bolle
nella soluzione.
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p10
Nota: 15% saccarosio solido
(w/v) o 25% glicerolo (w/v) in
soluzione “pesante” minimizza
miscelazione e stratificazione
gradiente ausili.